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              熒光顯微鏡的使用注意事項有哪些

              發布時間:2022-04-24   點擊次數:80次
                熒光顯微鏡是利用一個高發光效率的點光源,經過濾色系統發出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍光4200入)作為激發光、激發標本內的熒光物質發射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。這樣在強烈的對襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認,敏感性高,主要用于細胞結構和功能以及化學成分等的研究。
               
                熒光顯微鏡的基本構造是由普通光學顯微鏡加上一些附件(如熒光光源、激發濾片、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎上組成的。熒光光源——般采用超高壓汞燈(50一200W),它可發出各種波長的光,但每種熒光物質都有一個產生*強熒光的激發光波長,所以需加用激發濾片(一般有紫外、紫色、藍色和綠色激發濾片),僅使一定波長的激發光透過照射到標本上,而將其他光都吸收掉。每種物質被激發光照射后,在極短時間內發射出較照射波長更長的可見熒光。熒光具有專一性,一般都比激發光弱,為能觀察到專一的熒光,在物鏡后面需加阻斷(或壓制)濾光片。
               
                熒光顯微鏡使用注意事項:
               
                1、嚴格按照說明書要求進行操作,不要隨意改變程序。
               
                2、應在暗室中進行檢查。進入暗室后,接上電源,點燃超高壓汞燈5~15min,待光源發出強光穩定后,眼睛完全適應暗室,再開始觀察標本。
               
                3、防止紫外線對眼睛的損害,在調整光源時應戴上防護眼鏡。
               
                4、檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,超高壓汞燈發光強度逐漸下降,熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,Z多不得超過2~3h。
               
                5、光源壽命有限,標本應集中檢查,以節省時間,保護光源。天熱時,應加電扇散熱降溫,新換燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時,須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應避免數次點燃光源。
               
                6、標本染色后立即觀察,因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中保存,可延緩熒光減弱時間,防止封裱劑蒸發。
               
                7、熒光亮度的判斷標準:一般分為四級,即“-”表示無或可見微弱熒光。“+”表示僅能見明確可見的熒光。“++”表示可見有明亮的熒光。“+++”表示可見耀眼的熒光。
               

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